Родился 19 июля 1759 года в Курске. Родители дали ему имя Прохор в честь апостола Прохора (в двадцатисемилетнем возрасте при посвящении в иноки он получил новое имя - Серафим, под которым и стал впоследствии известен всему миру).

Его отец - Исидор Мошнин - был богатым купцом, имел кирпичные заводы и строил церкви и каменные дома. Исидор умер через три года после рождения сына.

Мать Серафима, Агафья, после смерти мужа стала продолжательницей его дела - достроила до конца церковь, которую не успел закончить Исидор.

Агафья была очень милосердной женщиной, любила раздавать милостыню, уделяя особое внимание девочкам-сиротам. Именно от матери Серафим унаследовал главную черту своего характера - милосердие.

В семилетнем возрасте Прохор вместе с матерью поднялся на верхушку строящейся колокольни и неожиданно, перегнувшись через перила, упал с высоты на землю. К великому удивлению, мальчик после такого опасного падения нисколько не пострадал. Когда перепуганная мать спустилась с колокольни, она обнаружила сына в целости и невредимости стоявшего на ногах.

Старший брат Прохора, Алексей, занимался торговлей и хотел приучить к этому делу своего младшего брата. Но у того не лежала душа к торговле. Вместо этого Прохор любил по три раза в день ходить в церковь, стараясь не пропустить ни одной службы- утреню, обедню и вечерню.

Прихожане умиленно улыбались, видя, что ребенок неистово молится, как старичок, не забывая при этом отдавать поклоны. В церкви его светлую головку можно было видеть только в первом ряду, поближе к священнику.

В детстве Прохор очень сильно заболел, у него был сильный жар, который мучил целую неделю. Никто уже не верил, что он сможет выздороветь. Но неожиданно температура спала, оставив ребенка неподвижным. Прохора разбил паралич, который практически не излечивается.

Все смирились с его участью, и только сам Прохор не сдавался, молясь день и ночь напролет в постели. Пока однажды во сне ему не явилась Божия Матерь и не пообещала вылечить его.

Вскоре мимо дома Мошниных проходил крестный ход с чудотворной Курской-Коренной иконой Знамения. Начался ливень, и процессия свернула во двор к Мошниным. Агафья, воспользовавшись случаем, поднесла больного сына к иконе. После этого Прохор начал выздоравливать. Ему было тогда десять лет.

Когда Прохору исполнилось четырнадцать лет, он решил отправиться со своими близкими друзьями в Киев к святыням и принять там монашеский постриг.

Мать, узнав о решении сына, не стала противиться его желанию, понимая, что ее сын не такой, как все. При прощании Агафья благословила его большим медным крестом, который старец Серафим носил на груди всю оставшуюся жизнь.

Прохор и пять его товарищей, придя в Киево-Печерскую лавру, поселились там, став послушниками. Больше двух лет он провел в лавре, молясь и наблюдая за жизнью лавры. Многое из того, что там происходило, Прохору не нравилось - говорилось одно, на самом деле делалось другое.

Терзаемый сомнениями, Прохор обращается за помощью к старцу Досифею из Китаевской обители. Досифей, обладавший даром прозорливости, указал Прохору, что ему следует поселиться в Саровской обители в Нижегородской губернии.

Обратный путь был долгий и нелегкий. К тому же Прохор зашел проститься с родными, понимая, что жизнь, которой он решил себя посвятить, уже не предоставит ему такого случая.

И только через два года Прохор вступил в Саровскую обитель. Новый послушник вызвал всеобщее внимание и уважение своим благочестием и смиренным поведением. Он ежедневно ходил в церковь, до конца выстаивал все службы, глядя в пол, чтобы не отвлекаться. Духовные книги читал непременно стоя.

В часы отдыха любил вырезать из дерева крестики для богомольцев.

Все восемь лет, что Прохор жил послушником, он усиленно постился.

Несмотря на пост, у него было полное белое лицо, проницательные голубые глаза, густые брови и густые русые волосы, окладистая борода и усы, высокий рост - 178 см. Прохор обладал огромной физической силой.

В 1780 году двадцатиоднолетний Прохор тяжело заболел, и все его тело распухло. Ни один врач не мог поставить правильный диагноз. Три года проболел Прохор водянкой, полтора из них пролежав в постели.

От помощи врачей Прохор отказался и выздоровел самым неожиданным образом - к нему вновь явилась Божия Матерь с апостолами Петром и Иоанном Богословом. Она возложила на голову Прохора правую руку и жезлом в левой руке коснулась бедра больного, отчего на этом месте возникло углубление, из которого вытекла вся вода из тела. Это углубление размером с кулак сохранилось у него на всю оставшуюся жизнь.

13 августа 1786 года послушник Прохор был пострижен в сан инока и получил новое имя - Серафим. Через год его рукоположили в иеродиакона. Еще через шесть лет его возвели в иеромонахи.