1. Разбавление сыворотки при использовании теcта ELISA 

ELISA является тестом для определения антител, которые, как полагают, вырабатываются против Вируса Иммунодефицита Человека (ВИЧ). Для проведения этого теста, сыворотка [крови] пациента должна быть разбавлена специальным раствором в соотношении 1:400. 

Необходимость такого необычно большого растворения сыворотки пациента [400 раз] удивила меня. В большинстве серологических тестов, выявляющих присутствие антител к микробам, используется чистая сыворотка [неразбавленная]. Например, в тестах, выявляющих антитела к вирусам гепатита А и В, вирусу коревой краснухи, сифилису, гистоплазме и криптококку, используется обычная сыворотка [неразбавленная]. (Важно заметить, что тест на антитела к ВИЧ Western Blot, также предусматривает разбавление плазмы в соотношении 1:50). 

Возникают очевидные вопросы: что делает ВИЧ столь уникальным, что тестируемую сыворотку необходимо разбавить в соотношении 1:400 и что произойдет, если сыворотка не будет разбавлена? 

2. Испытание теcта ELISA без разбавления сыворотки

Для того чтобы ответить на эти вопросы, я произвел эксперимент в медицинской лаборатории Йорктаун Хайтс (Yorktown Heights), находящейся в Нью-Йорке. При проведении этого эксперимента я использовал те же реагенты тест-систем, которые обычно используются при постановке теста ELISA в большинстве клинических лабораторий по всему миру. 

Сначала я взял образцы крови, которые при разбавлении в соотношении 1:400 дали отрицательный результат на антитела к ВИЧ. Затем, используя точно те же образцы сыворотки, я произвел еще одно тестирование, но на этот раз не разбавляя их. Неразбавленные, они все были ВИЧ-положительными [!].

Я протестировал около 100 образцов, и всё время получал такой же результат. Я протестировал даже собственную кровь, которая при разбавлении 1:400 была негативной, но в соотношении 1:1 [неразбавленная] показывала положительную реакцию на ВИЧ. Я должен упомянуть, что за исключением моей собственной крови, все остальные образцы [крови пациентов] были получены от врачей, запрашивавших ВИЧ-тестирование. Таким образом, наиболее вероятно, что большинство образцов крови, протестированных мною, принадлежали лицам, подверженным риску СПИДа. 

[Далее следовала таблица, иллюстрирующая то, как негативная реакция разбавленных в соотношении 1:400 образцов крови всегда изменяется на положительную, при постановке опыта с образцами 1:1, которую мы здесь рассматривать не будем]. 

3. Дискуссия 

Возможны три объяснения того факта, что неразбавленный образец крови всегда реагирует положительно при тестировании ELISA:

3.1. Антитела присутствуют у каждого из нас

Общепринято во всем мире, что ВИЧ-тест ELISA определяет наличие антител к тому, что известно как ВИЧ. Поскольку все неразбавленные образцы крови реагируют положительно при тестировании ELISA, то можно предположить, что каждый человек имеет антитела к ВИЧ. И это подразумевает, что каждый человек подвергся воздействию ВИЧ-антигена. Это могло бы означать, что все мы подверглись воздействию вируса, который, как верят, является причиной СПИДа. 

3.2. Каждый из нас имеет различный уровень антител к ВИЧ

Также общепринято во всем мире, что лицо, реагирующее положительно на антитела к ВИЧ, инфицировано смертоносным вирусом, который является причиной иммунодефицита. Таким образом, положительные реакции неразбавленных образцов сыворотки подразумевали бы, что каждый или, по крайней мере, все те образцы крови, которые я тестировал, включая мой собственный, заражены "смертоносным" вирусом. Только те образцы, которые реагируют в соотношении 1:400, имеют более высокий уровень "смертельной" инфекции, чем те, которые реактивны [положительны] только при неразбавленной сыворотке.

3.3. Тест не является специфичным для ВИЧ [т.е. не выявляет вирус]

Результаты, представленные здесь, могут также означать, что тесты, используемые для определения антител к ВИЧ, не являются специфичными для ВИЧ.

Интересен тот факт, что в некоторых странах, например в Великобритании, диагностика ВИЧ-статуса проводится только на основании [результатов] теста ELISA. Для этой цели не производится тестирование Western Blot или какие-либо иные тесты.

Существует только лишь один надлежащий путь установления чувствительности и специфичности данного теста - через золотой стандарт [четкое соответствие специфичных антител выделенному вирусу]. Однако, в связи с тем, что ВИЧ никогда не был изолирован как вирусный элемент, не существует и золотого стандарта для ВИЧ. 

В связи с тем, что не существует научного доказательства факта специфичности теста ELISA к ВИЧ-антителам, позитивный тест может означать наличие неспецифичных или полиспецифичных антител. Эти антитела могут присутствовать во всех образцах крови. Они, наиболее вероятно, являются результатом стрессовой реакции и не имеют никакого отношения к каким бы то ни было ретровирусам, не говоря уже о ВИЧ. В этом случае, позитивный тест может быть мерилом уровня подверженностистрессогенному фактору или оксидативным агентам.